Главная О компании Карта сайта Технологии для АПК Новые корма Рыбалка
3.3.2.2 Определение золы
Зольность определяется по методике Ассоциации официальных химиков-аналитиков International (2002), патент - 942,05 (Association of Official Analytical Chemists International (2002), Official Method 942,05).
Образцы сжигают в печи в течение шести часов при t + 500 ° С. После этого их взвесили и зольность была рассчитана с использованием уравнения 2:
Уравнение 2
% Золы = (D - A)/Массу пробы * 100/1
% Органического вещества = 100 - % Золы
где:
А - Масса пустого и сухого тигля
D - Масса тигля и золы
3.3.2.3 Определение сырого протеина
Содержание сырого протеина в муке из личинок мух и муке из куколок в образцах было определено путем измерения количества общего азота (N) в соответствии с методом, разработанным Ассоциацией химиков-аналитиков International (2002), официальный метод 4.2.07, в аппарате LECO FP528.
Два образца, каждый из которых весит 0,1 г, помещали в чашки из олова, а затем в аппарат LECO FP528. После того, как содержание азота было установлено, количество сырого протеина (CP) рассчитали, используя уравнение 3:
Уравнение 3
Сырой протеин (%) = Азот (%) х 6,25
3.3.2.4 Определение аминокислотного состава с помощью гидролиза
Аминокислотный состав определяли по методу, описанному Кунико и др., (1986). Во-первых образцы были подвергнуты гидролизу, а затем уже определялся общий аминокислотный состав.
Во время процедуры гидролиза образец весом 0,1 г был помещен в специализированные трубки гидролиза. Затем были добавлены шесть миллилитров соляной кислоты и 15% -ного раствора фенола. Затем образцы поместили в вакуум с помощью вакуумного насоса и затем был добавлен азот под давлением, затем пробирка нагревалась спиртовкой.
Данный образец нагревался в течение 24 часов при 110 ° С. После гидролиза образец был помещен в пробирку Эппендорфа. Затем аминокислоты были определены с помощью высокоэффективного жидкостного хроматографа. Аминокислоты определялись с использованием флуоресцентного детектора.
3.3.2.5 Определение сырого жира
Сырой жир или эфирный экстракт (EE) определяется с использованием в качестве реагента диэтилового эфира с помощью Tecator Soxtec System HT 1043 Extraction Unit по методу Ассоциации официальных химиков-аналитиков International (2002), официальный метод 920,39.
Два образца весом 2 г были помещены в химические стаканы. После этого добавили 50 мл диэтилового эфира и поместили в НТ Tecator Soxtec System 1043.
Образцы находились в сушильном шкафу в течение 2 часов при 100 ° С. Содержание сырого жира рассчитали с помощью уравнения 4:
Уравнение 4
% Сырого жира = ((Масса хим.стакана+Масса жира) - (Масса хим.стакана))/массу образцов * 100/1
3.3.2.6 Определение валовой энергии
Определение валовой энергии проводили с использованием изотермический бомбы CP 500, с помощью системы обработки данных (DDS), согласно руководства по эксплуатации CP 500.
Два образца весом 0,5 г были гранулированыт. Гранулированные образцы затем помещали в изотермической бомбе и заполняли чистым кислородом до достижения давления 3000 кПа. Затем сосуд был помещен в СР 500 и валовая энергия измерялась в МДж / кг, а содержимое стабилизировалось бензойной кислотой.
3.3.2.7 Определение сырой клетчатки
Определение сырой клетчатки проводили в соответствии с рекомендауиями Ассоциации официальных химиков-аналитиков International (2002), официальный метод 962,09.
Два образца весом 1 г помещают в стеклянный тигель, а его затем в экструзионный аппарат Fibertec / Dosifiber. Добавляют 0.128M H2SO4 и выдерживают образцы в растворе в течение 30 минут, а затем трижды промывают дистиллированной водой. После этого добавляют гидроксид натрия 0.313M и снова оставляют на 30 минут и затем образцы снова промывают три раза дистиллированной водой. После завершения этой процедуры образец сушат при +100 ° С в течение 24 часов, а затем сжигают в печи в течение 6 часов при +500 ° С. Содержание сырой клетчатки затем рассчитывают по уравнению 5:
Уравнение 5
Сырой протеин (%) =( (А - В))/Массу образца (г) * 100/1
Где:
А - масса сухого образца и масса тигеля
В - масса золы и масса тигеля
3.3.2.8 Определение жирных кислот
Состав жирных кислот определяли в соответствии с методами, разработанными Van Jaarsveld et al. (2000) and Kovacs et al. (1979) с использованием термического аппрарата Finnigan Focus - газового хроматографа (GC). Этот метод работает на основе липолиза, потому, что когда липидные связи разрываются - жирные кислоты можно выделить из образцов.
После этого, выделенные жирные кислоты метилировали, а затем анализировали с помощью газовой хроматографии.
Во время процедуры метилирования - 2 г образца взвешивают и насыпают в экстракционную трубку. После этого в нее заливают 20 мл смеси хлороформа и метанола в соотношении (2: 1). Образцы смешивают в течение одной минуты и затем помещают в экстракционную воронку и сушат с помощью вакуумного фильтра.
Колбу вновь заполняют 50 мл смеси хлороформа и метанола в соотношении (2: 1), раствор перемешивают и затем переливают в пробирку Kimax, и сушат в присутствии азота на водяной бане при 45 ° С.
После этого добавляют 2 мл реагента transmethylating и оставиляют на водяной бане при + 70 ° С в течение двух часов. Потом образцы охлаждают, добавляют 1 мл дистиллированной воды и 2 мл смеси гексан-вихря. Образцы снова сушат в присутствии азота на водяной бане при +45 ° С. Затем колбу герметично закрывают и охлаждают до + 4 ° С. После образцы анализируют с помощью газовой хроматографии для определения содержания в них жирных кислот.
3.3.2.9 Анализ минерального состава
Минеральный состав определяли с помощью метода сжигания по методике сельскохозяйственной лаборатории ассоциации Южной Африки (Alasa), справочника кормов и анализа растений - выпуск №1, методом №. 6.1.1 для кормов и растений.
Два грамма сухих личинок и куколок сжигают в течение восьми часов при +480 ° С. Затем приливалось 5 мл 50% раствора соляной кислоты и общее количество раствора доводилось до 40 мл с помощью дистиллированной воды. Образцы, после этого, исследовались индуктивно-связанной плазмой. По этому методу определили наличие следующих минералов: P, K, Ca, Mg, Na, Cu, Mn, Fe, Al, Zn и B.